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我们在各种各样的分析格式,读出和目标类型使用FLIPR

实施例试验:

表达靶GPCR细胞加载钙通量染料(FLUO-4)和与所述GPCR的配体在不存在或各种化合物结合于GPCR和抑制钙响应的存在下处理。

最近,我们都用了FLIPR利和FLIPR利(与发光选项)使用aqueorin购自PerkinElmer细胞系成功屏384和1536孔格式。我们有筛选过每次测定一百万的化合物在使用“测定准备板”这个格式(第一除了井的化合物)的经验。

人中性粒细胞从供体血液中分离,用​​钙通量染料孵育,分配到384个孔板中,并随FMLF配体的浓度处理。

A.铊通量测定法用于测量钾离子流进入细胞。铊内容替换钾测定并且一旦在细胞内,结合于变为荧光染料。

从表达钾通道刺激后,打开所述通道(A)或化合物抑制通道开口(B)或增强通道开口(C)细胞B. FLIPR响应。

人中性粒细胞从通过的Densite梯度离心全血供体的,负载Fluo-样染料,分配到在化合物的存在下孵育1536个孔板中分离,并用激动剂加入上线筛选。从选择孔的响应被示出在图像中。

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